血清纤维蛋白肽A

微血栓形成微血管溶血性贫血低血容量休克内出血

纤维蛋白肽A是反映体内凝血活性及纤维蛋白最终形成血栓的可靠指标。含量增高反映凝血系统激活和凝血酶的生成，见于高凝状态和血栓性疾病，原发性和继发性纤溶的鉴别，抗凝治疗过程中的监测指标。

抽血化验。　　

（1）血浆标本的采集：用塑料注射器顺利取静脉血4.5ml（开始的2ml弃去），加入盛有0.5ml抗凝剂（肝素钠500u和aprotinin 5000u）的试管中，立即混匀。

3000r/min离心20min，分离血浆，吸上层血浆至另一试管，立即作下一步处理或置－20℃保存。　　

（2）血浆标本的皂土吸附处理：目的是彻底除去纤维蛋白原。

40mg皂土加入45ml的聚丙烯塑料离心管中，加入0.5ml吸附缓冲液，充分混匀，加入1ml血浆，在回旋混合器上震荡混匀，再缓慢震摇10min。

5000r/min离心15min，吸取上清液至另一试管，再如上法以皂土吸附处理1次。然后吸取上清液1ml加到一预先盛有20g/LTween20溶液50μl的试管中，混匀。最终标本已稀释20倍。　　

（3）FPA包被：取1μg/ml的FPA溶于包被缓冲液中，加入聚苯乙烯反应板，200μl/孔，加盖，37℃过夜。次日弃孔内液。以洗涤液洗板5次，每次3min，甩干，备用。　　

（4）FPA标准品：以标本稀释缓冲液配成；25，12.5，6.25，3.12，1.56，0.78ng/ml等6个不同浓度。分别吸取0.9ml于一系列小试管中，再在各管中加入0.1ml的工作浓度的兔抗人FPA。经皂土吸附处理的待测血浆标本作原倍、1∶2、1∶4倍3个浓度如上操作。上述各管置37℃反应3h。　　

（4）从温育后的上述各管中分别吸取200μl加入已包被的FPA的反应板各孔中，置板于37℃保温2h，洗板5次，甩干。　　

（6）各孔加HRP-羊抗兔IgG（以标本稀释液稀释至工作浓度）200μl/孔，置板于37℃温育2h，洗板5次，甩干。　　

（7）各孔加新鲜配制的底物液200μl，37℃避光精确反应3min，各孔立即滴加3mol/L H2SO4 50μl以终止反应。在酶标上测定各孔的A值（492nm）。

　　(1)采血要顺利不应>45s，且开头2ml弃去，注射器要硅化或用塑料注射器。

　　(2)采血后立即注入盛有抗凝剂的试管中，并在冰水中迅速混合，若需保存则以经皂土吸附处理后-20℃较妥。