血清抗SS-A(Ro)抗体

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抗SS-A(Ro)抗体对干燥综合征等自身免疫疾病的诊断有作用。40%-90%原发性干燥综合征患者。约75%先天性心脏病和新生儿狼疮患者。抗SS-A阳性/抗SS-B阴性患者相比，抗SS-A和抗SS-B阳性的SLE患者，较少肾脏损伤，抗dsDNA也较少阳性，这种抗体模式也常在迟发性SLE患者中见到。

　　抗SS-A（Ro）抗体的测定原理：用间接免疫荧光法检测时，抗SS-A/Ro、抗SS-B/La阳性结果表现为核的细斑点型免疫荧光，但抗SS-A/Ro引起的荧光亮度较弱。其操作与原理均与抗核抗体检测相同。双向免疫扩散法仍为抗SS-A/Ro、抗SS-B/La的常用检测方法，但敏感性不高。目前常用免疫印迹法，其原理可参看抗Sm抗体测定。最近也有人用基因重组的52kD和60kD蛋白质建立ELISA法测定抗SSA/Ro抗体，用重组48kD蛋白质建立ELISA法测抗SS-A/La抗体，其敏感性较之免疫扩散法约高千倍，但因特异性问题（重组抗原中常含有细菌产物）未广泛应用。一种敏感性和特异性都很高的方法是放射免疫沉淀法，此法是用放射性36S-蛋氨酸或32P-正磷酸盐标记组织培养细胞，标记上36S的代表所有蛋白质，标记上32P的代表磷酸化蛋白，此外，细胞内RNAs也标记上32P。将待测血清与标记上放射性核素的组织细胞提取物混合，抗体与标记抗原反应，形成免疫复合物，用葡萄球菌A蛋白使免疫复合物沉淀，溶解后行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、放射自显影，与自身抗体结合的放射性标记核抗原形成的条带即可显现出来，参照标准品形成的条带进行分析，即可做出诊断。此法目前还只限于实验室研究。

　　试剂：血清 1ml。

　　操作方法：

　　（1）沉淀法：与抗Sm、抗RNP或抗SS-B等类似的检测方法不同，小牛、兔、胸腺提取物由于没有足够浓度的Ro抗原，不能用于免疫双扩散和反相免疫电泳，而主要从人脾组织或人培养细胞（WI-L2）获得。沉淀带与参考血清相同，核实为SS-A特异性。

　　（2）免疫印迹法：抗原采用细胞培养物如HeLa、MolT-4。当与参考血清有两条相同典型带（60×103和52×102）时，可确证为抗SSA（Ro）阳性。

　　（3）ELISA：可用亲和纯化或重组52×103和60×103蛋白，或相对纯化的hY-RNP颗粒作抗原。

　　抗SS-A(Ro)经常能在ANA阴性的SLE患者中查及，许多基质特别是常规甲醇固定的Hep-2细胞，在IFT反应中，抗SS-A不以ANA的形式表现。这是因为其滴度低，部分抗原位于胞质或者在固定的过程中抗原被洗掉。如临床怀疑为SLE，而ANA阴性，应检测抗SS-A(Ro)以及抗磷脂抗体。

　　虽然已知抗SS-A(Ro)有两种不同的靶抗原(Ro52、Ro60)，但大多数检测方法，如免疫扩散、反相免疫电泳、以纯化抗原建立的ELISA法，不能区分它们。免疫印迹法和以Ro52、Ro60两种重组抗原建立的ELISA法，可以分别检出两种抗SS-A(Ro)。根据免疫印迹法统计的资料报道，Ro52抗体与干燥综合征有更强的联系，而Ro60抗体与SLE相关性更密切。但由于30%的Ro阳性血清免疫印迹法为阴性，所以该结论有局限性，特别是由于Ro60抗原表位是部分构象性的，在免疫印迹法中被破坏。如采用足够灵敏的方法，绝大多数Ro阳性血清可以检测到两种抗体。