不稳定血红蛋白

不稳定血红蛋白试验主要用于不稳定血红蛋白病的诊断。升高(或阳性)：不稳定血红蛋白病。

①将放于37℃水浴中预热5min的装有17%异丙醇溶液1ml的小试管取出，立即加入0.1ml血红蛋白液，混匀后再放入水浴中，立即计时，于5、10、20、30、40min分别观察沉淀产生。　　②结果判断：　　()5min出现沉淀，20min出现大块沉淀。　　() 5min出现混浊。到40min出现粗颗粒。　　() 10min出现混浊，到40min出现细颗粒。　　() 20min出现混浊，40min出现极细颗粒。　　(-) 温育40min后仍透明或稍混浊而无颗粒。　　

(3)红细胞变性珠蛋白小体检查：　　①取煌焦油蓝试剂0.5ml置小试管内，加新鲜血3～4滴，混匀，加塞，置37℃温箱中孵育。　　②在10min，1h，24h各取出一滴制成薄血片，立即风干，油镜下观察。　　③在油镜下计数500个红细胞，记录出现蓝色颗粒状折光小体的红细胞数目，求出阳性百分率

　　(1)热不稳定试验：

　　①被检Hb要新鲜制备。陈旧Hb可转变为高铁Hb。会出现假阳性。

　　②保温时间要准确，温度要恒定以免出现假阳性。

　　(2)异丙醇试验：

　　①17%异丙醇溶液配制后放置不宜过久，否则易出现假阴性。

　　②血红蛋白液须新鲜。如保存较久，出现高铁血红蛋白，可形成假阳性。

　　③试剂要预热，严格控制温度以防假阳性。

　　④高HbF及G-6-PD缺乏的标本亦可出现阳性。

　　(3)红细胞变性珠蛋白小体检查：

　　①本试验亦可用静脉抗凝血做。

　　②孵育时间与不稳定血红蛋白性质有关。一般1～2h即可出现明显的蓝色球形折光小体，但也有的不稳定血红蛋白需更长时间的孵育。才出现典型的变性珠蛋白小体。

　　③制片后应及时计数，存放过久，则红细胞内变性珠蛋白小体消失。如不能及时计数，可存放于干燥器或37℃温箱。

　　④煌焦油蓝染色后不能用伊红-美蓝染色液复染，复染后可减少计数结果。

　　⑤变性珠蛋白小体需与网织红细胞鉴别。前者包涵体呈较大圆形，均匀，弥散沉淀，整个红细胞基质消失，而且需培育10min以上才逐渐清晰。而网织红细胞在血液与煌焦油蓝混合后数分钟内显示出网状沉淀，红细胞基质完整。