聚合酶链反应技术

有利于确定细菌感染的来源及途径，它是一种很有前途的幽门螺旋杆菌检测方法。聚合酶链反应技术诊断幽门螺旋杆菌是否存在仅需微量的DNA，而不需要活菌存在(这不同于其他幽门螺旋杆菌检测方法)，它不仅可以检测胃内幽门螺旋杆菌，还可望检出胃以外部位，如牙斑、粪便内的幽门螺旋杆菌

1.材料：标本采自经胃镜检查确诊的胃、十二指肠溃疡、各类胃炎及溃疡合并胃炎病例，在距幽门口5cm内钳取胃粘膜2份(每例检查前2周停用抗HP药物)，分别作PCR及病理切片检查，检测HP。　　

2.研究方法：PCR技术：采用厦门长城生物工程有限公司生产的HPDNAPCR诊断试剂盒，DNA抽提采用水煮沸法，引物为尿素酶基因片段，其核着酸顺序为：引物1为5'-AAGCTTTTATTAGGGGTTT—3'，引物2为5'-TTATTACGCTTC—3'，扩增产物为456bP，94℃预变性5分钟，94℃30秒，55℃30秒，72℃1分钟共32个循环，72℃延伸5分钟，2%琼脂糖凝胶电电泳20分钟， BE染色在456bp出现条带为阳性， 根据阳性带亮度分别作、定量判断。

　　不适宜人群：

　　(1)凝血功能差者。

　　(2)胃血管瘤(质软)。

　　检查前禁忌：

　　1.检查前一天避免吸烟，以免检查时因咳嗽影响插管。

　　2.要有成人亲友陪伴，术前取下假牙。

　　3.检查前一天晚饭后不应再吃东西，检查当天早晨不应再喝水。

　　检查时禁忌：

　　1.告知医生您的既往病史及药物过敏史。

　　2.嘱病人在操作中不要做过多的吞咽动作，防止唾液吸入气道及引起喉头疼痛。

　　3.向病人说明胃镜检查的目的，鼓励病人树立信心，勿紧张，配合医生顺利完成检查。抽取胃粘膜检查即可。

　　4.准备好基因片段，保证电泳完成。