混合淋巴细胞培养试验

免疫力降低免疫性肾炎免疫缺陷免疫损害血清免疫球蛋白可升高免疫功能障碍正常免疫球蛋白减少免疫力下降免疫性溶血

混合淋巴细胞培养试验为与供-受者相容的程度呈负相关的试验。异常结果：肾移植时，活体供肾者的转化率应<10%;尸体供肾者的转化率应为>10%。只能在同一批实验中选用低反应配组。淋巴细胞转化率10%者为不同两个体间的组织是相容的。 淋巴细胞混合培养试验用以检测患者的免疫状态。T淋巴细胞数减少时，转化率也降低。 可作为器官和骨髓移植的配型方法之一，用来选择合适的供体。如转化率高为供受者分歧用。转化率低，移植后的成功率高。

1.供体淋巴细胞的制备　　新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中，轻稳加在液面上.

2000 r/min离心20 min，吸取中间雾状淋巴细胞层. 生理盐水洗涤2次. 台盼蓝染色，计数板计数. 调整细胞密度为2×109/L，分成3管，各自离心，留取沉淀. 每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水，37℃水浴40 min， 生理盐水离心洗涤2次. 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原.标记为D。　　

2.受体淋巴细胞的制备　　新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中，轻稳加在液面上.

2000 r/min离心20 min，吸取中间雾状淋巴细胞层. 生理盐水洗涤2次. 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液调整细胞密度为1×1010/L. 标记为R。　　

3.混合淋巴细胞培养　　将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板，置37℃，50 mL/L CO2孵箱中培养24 h. A组：R 50 μL+D 50 μL;B组：R 50 μL+D 50 μL+IL？2纯化中和mAb 15 μL;C组：R 50 μL+IL？2纯化中和mAb 15 μL;D组：R 50 μL. 每组3个复孔，空白对照组为RPMI 1640培养液100 μL

　　检查时：本试验可作为器官移植筛选供体的方法，转化率低者移植成功率高，转化率高者成功率低。

　　不适宜人群：排斥反应大的人。