乳头溢液检查

乳腺癌的远处转移乳房肥大乳头破碎泌乳障碍乳痛症涨奶囊肿结节溃疡乳汁淤积

乳头溢液分生理性溢液和病理性溢液两类。前者见于妊娠期和授乳期妇女，后者是乳腺疾病的临床表现。检查乳头异常溢液有助于乳腺疾病的诊断。

(1)取孕期16～20周羊水15～30ml，1000r/ml离心10min。

(2)弃去多余上清液，留1ml羊水和沉淀细胞，轻轻打散成细胞悬液。

(3)移入25ml方形培养瓶中，加pH6.5～6.8(含青霉素100U/ml，链霉素100μg/ml)的培养基3ml及小牛血清1ml，置37℃温箱中培养。

(4)培养7～10天后可见大量成纤维样或上皮样细胞集落。此时可调换新鲜培养液。

(5)待细胞集落扩大成片，并有许多透亮的圆形分裂细胞时，即可加入秋水仙素，使最终浓度为0.1～0.3μg/ml，置37℃温箱中再培养5～6h(上述过程均在无菌条件下进行)。收获标准：①以成纤维细胞为主要类型，成片细胞生长;②以10倍目镜和20倍物镜观察，生长的细胞克隆覆盖1个或1个以上完整视野;③见到10个以上透亮的圆形细胞和10个以上双圆形光亮的分裂细胞。

(6)如果细胞生长不旺盛，生长周期不齐或细胞老化，未达收获标准，可在原瓶继续传代培养。方法：在无菌条件下先倒去培养液，加入2.5g/L无菌胰蛋白酶液数滴，摇动后倒去。再加入胰蛋白酶5～10滴，在37℃下轻轻摇动约5min，使贴壁细胞脱落。加入含小牛血清的新鲜培养基4ml，在37℃静置培养4～5h。再小心更换培养液，继续培养，一般传代后3～5天即可收获。

(7)将培养液移至刻度离心管中，加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培养瓶内，置37℃温箱中5min，然后用弯头吸管冲洗贴壁细胞(也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化)。将脱离瓶壁的细胞倒入离心管中，与原培养液相混合，并用少量温热生理盐水冲洗培养瓶，洗下的细胞也一并倒入该离心管，以1000r/min离心10min。

(8)吸弃上清液，加入预温37℃的0.075mol/LKCl低渗液3～5ml，置37℃10～15min。

(9)预固定、固定及制片均与外周血细胞染色体标本的制备法相同。

　　于月经周期的第四周进行乳头溢液体标本采集。

　　采集标本前应进行乳房触诊，检查有无肿块及肿块位置，然后冼净乳头，擦干。若采集微生物培养标本尚须将乳头和乳晕部消毒后以无菌操作收集乳头溢液。若溢液较多，应以无菌纱布拭去最初的少量溢液，收集新分泌的溢液：

　　①自然溢出液：根据检验目的直接收集于载玻片上，制备涂片或接种于培养基内即可。若溢液较丰富，亦可收集于小离心管内，经离心处理后取沉淀物涂片或接种培养。

　　②有肿块乳腺分泌物自肿块的远乳头侧顺导管引流方向用手轻按摩和挤压，则集分泌物。

　　③无肿块乳腺分泌物可沿乳晕周围轻轻做向心性按摩挤压，采集分泌物。

　　④刮片或印片：乳头或乳房其它部位有糜烂、溃疡或瘘管口者，先拭去表面的腐烂坏死组织，再用小刮板刮取病理分泌物涂片，也可用消毒干燥的载正好片在病损部位轻压印片进行检查。