血浆游离皮质醇

体型异常肚子疼毛发异常恶心与呕吐血压高腹胀食欲异常

血浆游离皮质醇检查对皮质醇失调引起的疾病诊断有辅助意义。升高见于皮质醇增多症(库欣综合征)、异位产生ACTH的肿瘤(燕麦型肺癌、胰腺癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、卵巢癌、睾丸癌、大肠癌、胆囊癌、乳腺癌、纵膈瘤等)、垂体前叶功能亢进症。降低见于肾上腺皮质功能低下、艾迪生病、西蒙病(Sinmond病)、席汉病(sheehan病)、先天性肾上腺皮质增生症、长期应用类固醇激素。

(1)血浆和尿样品测定：取0.1ml血浆或万分之一的24h混合尿，都用蒸馏水稀释至0.5ml，于10ml抽提管中，加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH0.2ml，抽提5min，静止片刻弃去上层液，下层二氯甲烷抽提液用水洗2次，每次1ml，摇1min，离心1500r/min 3min，弃去水层，取二氯甲烷提取液双份各1ml(复管)，45℃压缩空气吹干，加3H-皮质醇7000cpm/10μl，45℃吹干，各管加0.2ml抗血清应用液(1∶3800用1g/L GPS稀释)，摇匀置4℃过夜，以下步骤同标准管。　　

(2)标准曲线制作：0，0.1，0.3，0.6，1.0，2.0，4.0ng(各点做复管)，各管加3H-皮质醇10ml，吹干，每管加抗体0.2ml，另取四管各加3H皮质醇10ml，分别加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作总脉冲测定管，另二管作非特异性测定(BN%)摇匀后，放4℃过夜。次日各管加5g/L GPS0.1ml摇匀，再加2.5g/L DCC0.5ml(总管T不加)。分离游离与结合物;摇匀4℃停放10min，3000r/min离心10min吸取上清液0.4ml，加到8ml闪烁液中，混旋1min，避光4h后，用液烁计数仪测量。

　　(1)各管加入3H或标准必须吹干，然后加抗体，因为3H或标准是乙醇配制，否则会损害抗体。

　　(2)加定量的3H须根据实验情况而定(本文加7000cpm)，在相应的范围内3H抗原加入量越少灵敏度就越高。