脱落细胞

宫腔粘连肚子疼恶心与呕吐肝肿大腹水脓尿便血腹胀脾肿大发烧腹部肿块

脱落细胞检查对癌症的诊断有辅助意义。癌瘤组织代谢高，癌细胞的表面缺乏钙和透明质酸酶，彼此粘着力比正常细胞低，易于脱落。

一，取材　　

1．自然管腔器官内表面粘膜正常情况下，人体器官粘膜上皮细胞经常有脱落更新，有病变的粘膜上皮细胞更易脱落，如阴道上皮，支气管粘膜上皮、肾盂膀胱移行上皮、和乳腺导管上皮等都是自然脱落的上皮细胞。鼻咽部、口腔、食管和胃粘膜的标本除自然脱落细胞外，部分是人工乔取或刷洗所得。　　

2．体腔抽出液：有胸膜腔、腹膜腔、心包腔积液和脑脊髓膜腔积液等。　　

3．针吸细胞：利用细然穿刺病变或肿物，抽吸出少许病变组织细胞作涂片检验，称针吸细胞学。吸出的细胞完全是人为的脱落细胞，由于对其诊断的方法和价值与自然脱落细胞相似，故归属脱落细胞，也可以说是本门学科的一个发展。常用于乳腺肿块和皮下组织肿物的穿刺；肿大淋巴结、甲状腺和涎腺和穿刺；在超声波像定位下对肝、胰等器官肿物的穿刺。　　

(2)、涂片制作方法　　

(1)涂片前准备工作及涂片方法　　

1.涂片前准备工作　　

(1)保证标本新鲜，取材后尽快制片。　　

(2)涂操作要轻巧，避免挤压以防止损伤细胞。涂片要均匀，厚薄要适度，太厚细胞堆叠，太薄细胞过少，均影响诊断。　　

(3)玻片要清洁无油渍，先用硫酸洗涤液浸泡冲洗，再用75%乙酸浸泡。　　

(4)含蛋白质的标本可直接涂片，缺乏蛋白质的标本，涂片前先在玻片上涂薄层粘附剂，以防止染色时细胞脱落，常用粘附剂为蛋白甘油，由等量生鸡蛋白和甘油混合而成。　　

(5)每位患者的标本至少涂两张玻片，以避免漏诊。涂片后立即在玻片一端标上编号。　　

2.涂片制备方法　　

(1)推片法：用于稀薄的标本，如血液，胸、腹水等。取离心后标本一小滴滴在玻片偏右侧端，用推片用30度夹角将玻片上检液轻轻向左推。　　

(2)涂抹法：适用于稍稠的检液，如鼻咽部标本。用竹棉签在玻片上涂布，由玻片中心经顺时针方向外转圈淫抹;或从玻片一端开始平行涂抹，涂抹要均匀，不宜重复。　　

(3)压拉涂片法：将标本夹于横竖交叉的两张玻片之间，然后移动两张玻片，使之重叠，再边压边拉，获得两张涂片。该法适用于较粘稠标本，如痰液。　　

(4)吸管推片法：用吸和将标本滴在玻片一端，然后将滴管前端平行置于标本滴上，平行向另一端均速移动滴管即可推出均匀薄膜。此法亦适用于胸、腹水标本。　　

(5)喷射法：用配细针头的注射器将标本从左至右反复均匀地喷射在玻片上，此法适用于各种吸取的液体标本。　　

(6)印片法：将切取的病变组织用手术切开，立即将切面平放在玻片上，轻轻按印。此方法为活体组织检查的辅助方法。　　

(2)涂片的固定　　固定(fication)的目的是保持细胞自然形态，防止细胞自溶和细菌所致的腐败;固定液能沉淀和凝固细胞内蛋白质和破下细胞内溶酶体酶，使细胞不但保持自然形态，而且结构清晰，易于着色。因此标本愈新鲜，固定愈及时，细胞结构愈清晰，染色效果愈好。　　

1.固定液：细胞学检查常用的固定液有下列三种：第一种乙醚酒清固定液：该固定液渗透明性较强，固定效果好适用于于一般细胞学常规染色;二种是氯仿酒精固定液：又称卡诺氏固定液。其优点同上;第三种95%酒精固定液：适用于大规模防癌普查。制备简单。但渗透作用稍差。　　

2.固定方法　　

(1)带湿固定：涂片后未待标本干燥即行固定的方法称带湿因定。此法因定细胞结构清楚，染色新鲜。适用于巴氏或HE染色。痰液、阴道分泌物及食管拉网涂片等常任常用此方法。　　

(2)干燥因定：涂片后未待其自然干燥，再行固定。适用于稀薄标本如尿液、胃冲洗液等，也适用于于瑞特染色和姬姆萨染色。　　

3.固定时间：一般为15-30min。含粘液较多标本，如痰液、阴道分泌物、食管拉网等因定时间在适当延长;尿液、胸、腹水等涂片不含粘液，固定时间可酌情缩短。　　

(3)涂片的染色　　

1.染色的目的和原理：染色的日的是借助于一种或多种染料，使组织和细胞内结构分别着不同的染色，这样在显微镜下能清楚地观察细胞内部结构，作出正确判断。　　组织细胞染色原理至今尚无满意的解释，可能是物理作用，也可能是化学作用，或者是两者综合作用的结　果。　　染色的物理作用是利用毛细管现象，渗透、吸收和吸附作用，使染料的色素颗粒牢固地进入组织细胞，并使其显色。　　染色的化学作用是渗入组织细胞的染料与其相应的物质起化学反应，产生有色的化合物。　　各染料都具有两种性质，即产生颜色;征收被组织形成亲和力。这两种性质主要由发色基因和助色基因所产生的。　　发色基团：苯的衍生物具有可见光区吸收带。这些衍生物显不的吸收带与其价键的不稳定性有关，如对苯二酚为无色，当其氧化后失去两个氢原子，它的分子或则变为有黄色的对醌，这种产生颜色的醌式环称为发色基团。若一种化合物含有几个环，只要其中有一个醌式环就会发出颜色，称此发色基团为色原(chromogen).　　助色基团：是一种能使化合物以生电离作用的辅助原子团(酸碱性基团)。它能使染色的色泽进一步加深，并使其与被染色组织具有亲和力。　　助色基团的性质决定染料是酸性碱性。碱性染料具有碱性助色基团，在溶媒中产生的带色部分为带正电荷的阳离子，吻与组织细胞内带负电荷的物质结合而显色。如细胞核内的主要化学成分脱氧化核糖核酸易被苏木素染成紫蓝色，称嗜碱性。酸性染料具有酸性用力色基团，在溶酶中产生带色部分为阴离子，易与组织细胞内带正电荷部分结合而显色，此性质被称为嗜酸性，如细胞浆内订成分为蛋白质，易与伊红或橘黄结合呈红色或橘黄色。　　

2.常用染色方法：临床日常工作中较为常用的染色方法有下列3种：　　

(1)巴氏染色法：本法染色特点是细胞具有多色性颜色，色彩鲜艳多彩。涂片染色的透明性好，胞质颗粒分明，胞核结构清晰，如鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色;角化细胞显粉红色;而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色，适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。此方法的缺点是染色程序比较复杂。　　

(2)苏木精—伊红(hemotoxylin eosin，HE)染色法：该方法染色透明度好，核与胞质对比鲜明。染色步骤简便，效果稳定。适用于痰液涂片，觖质核呈紫蓝色，胞质淡玫瑰红色，红细胞呈淡朱红色。　　

(3)瑞特—吉姆萨染色法(wrightgiemsa atain);本方法多用于血液，骨髓细胞学检查。胞质内颗粒与核安危质结构显示较清晰。操作简便。

　　疑为口腔癌，应在口腔内任何结节和经久不愈的溃疡处采样。

　　疑是鼻咽癌时，于鼻咽部可疑部位采样。

　　高度怀疑肺癌时，应取支气管咳出的新鲜痰液，或在纤维支气管镜直视下，采取病灶部位分泌物。

　　疑有乳癌可取乳头溢液涂片检查，或切除乳腺肿块进行病理检查。

　　可疑食道癌，应于x线提示部位作食道拉网法，或在食道镜直视下擦拭病灶处取样。拟诊胃癌时，应取胃冲洗液或胃液作沉渣标本，或在纤维胃镜直视下于病灶处采样。在十二指肠引流液中，如找到癌细胞，对十二指肠癌、胆道癌、胰头癌等诊断很有帮助。若在内窥镜直视下，于十二指肠可疑处取样检查，对可视范围内癌的发现是有效的。应用逆行胰胆管造影(ERCP)，可窥视乏特壶腹可疑肿瘤处采样。疑似直肠癌时，可在直肠镜直视下，擦拭病灶处采样。对高位结肠癌时，采用纤维结肠镜直视下取样，可提高癌细胞的检出率。

　　疑有脑膜癌或白血病、肺癌往脑转移时，应注意脑脊液中癌细胞的检查。

　　疑为癌转移性胸、腹水，查找癌细胞很有必要。

　　怀疑输尿管癌、膀胱癌，应取晨尿查找癌细胞。

　　疑为前列腺癌，应取前列腺分泌液涂片、检查。

　　对宫颈糜烂患者，可作宫颈涂片或刮片找癌细胞，作为一种筛滤宫颈癌的主要方法，若有“宫颈间变”时，更应追访检查。用宫腔吸管吸取分泌物，查找癌细胞，有助于子宫内膜癌的诊断。